去甲雄烯二酮(Norandrostenedione,简称NAD)是一种内源性甾体激素,属于雄激素前体物质,在人体中通过生物转化参与睾酮的合成。近年来,随着运动医学和临床内分泌学的发展,去甲雄烯二酮的检测需求显著增加。在竞技体育中,NAD因其潜在的促蛋白合成作用被列为违禁药物;在临床上,其异常水平可能与多囊卵巢综合征、先天性肾上腺皮质增生症等疾病相关。因此,建立精准、可靠的检测方法及标准对保障公平竞赛、辅助疾病诊断具有重要意义。
去甲雄烯二酮检测主要涉及以下场景:
1. 反兴奋剂检测:国际反兴奋剂机构(WADA)明令禁止运动员使用NAD或其前体物质;
2. 内分泌功能评估:通过血清/尿液检测辅助诊断肾上腺或性腺相关疾病;
3. 代谢研究:探究甾体激素合成途径异常与代谢综合征的关联性。
目前主流的检测方法包括:
作为黄金标准,LC-MS/MS具有高灵敏度(检测限可达0.1 ng/mL)和特异性,能有效区分NAD与结构类似物,广泛用于WADA认证实验室。
包括化学发光免疫分析(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA),操作简便但存在交叉反应风险,多用于临床初步筛查。
需衍生化处理样本,前处理复杂且耗时,适用于法医学溯源分析。
各领域检测需遵循严格标准:
- WADA技术文件:规定尿液中NAD的最低检测性能要求(MRPL为5 ng/mL);
- CLIA认证标准:实验室需定期进行室间质评(EQA),变异系数需<15%;
- ISO 15189规范:要求建立从样本采集到结果报告的全流程标准化操作程序(SOP)。
值得注意的是,检测方法的选择需结合样本类型(血清、尿液或唾液)、检测目的(定性或定量)以及成本效益综合评估。随着微流控芯片、生物传感器等新技术的发展,去甲雄烯二酮检测正朝着快速化、便携化方向革新。